探针法牛支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Bovis

货号：Mqt-bov-20      规格：20个反应

货号：Mqt-bov-50      规格：50个反应

货号：Mqt-bov-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，    特异性检测牛支原体，与其他生物无交叉反应。

2，    灵敏度高，最低检测极限相当于反应液中约含1个CFU。

3，    使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，    带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，    带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

牛支原体（Mycoplasma Bovis）是牛传染性支原体肺炎（又称牛烂肺病）的病原体，属于柔膜菌纲（Mollicutes），营寄生生活，其代谢网络高度简化，依赖宿主提供现成的营养物质以满足生长需求。由于缺乏完整的三羧酸循环（TCA）和电子传递链，其能量代谢主要依赖糖酵解途径，将葡萄糖转化为乳酸或乙酸，并伴随有限的ATP生成。这种低效的产能方式与其在宿主体内的低复制率相符，也解释了其在体外培养时的缓慢生长特性。牛支原体无法合成多种必需氨基酸（如精氨酸、色氨酸）和不饱和脂肪酸，必须从宿主细胞摄取这些物质。在实验室培养时，需在培养基中添加动物血清（提供胆固醇和脂肪酸）以及葡萄糖等碳源。此外，牛支原体能够利用宿主体内的某些代谢中间产物（如丙酮酸和乳酸），这可能与其在感染部位的生存策略有关。代谢副产物（如过氧化氢和有机酸）的积累可能对宿主组织造成氧化损伤，加剧炎症反应。值得注意的是，不同菌株的代谢能力可能存在差异，这可能与其致病性和宿主适应性的多样性相关。

牛支原体的检测通常结合微生物培养、分子生物学和血清学方法。传统培养需使用特殊培养基（如改良Hayflick培养基或SP-4培养基），但由于生长缓慢（数天至数周）且易受污染，现已较少单独使用。PCR技术因其高灵敏度和特异性成为常用方法，常用靶标包括16S rRNA基因、uvrC基因或特异性膜蛋白基因。实时荧光定量PCR（qPCR）可进一步提高检测效率，并实现病原体载量分析。对于大规模筛查，ELISA可用于检测血清中的特异性抗体，但存在与其他支原体的交叉反应可能。

由于受到无乳支原体及其他一些近亲支原体的干扰，基于16S rRNA基因的PCR方法往往无法准确鉴别牛支原体。基于DNA复制修复基因uvrC的PCR方法可以对这些支原体进行特异性区分，而且该基因十分稳定，很少发生变异，因此探针法牛支原体实时定量PCR试剂盒选择uvrC基因作为靶点对牛支原体进行PCR鉴定，经BLAST验证，具有非常好的特异性，与其他生物的基因组无交叉反应。通过检测多种近亲支原体和常见细菌，以及多个组织样品，证实本试剂盒对牛支原体具有特异性，适用于牛支原体的检测和鉴定。

本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。