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ApeKI
ApeKI图片
限制酶产地:国产限制性内切酶


产品名称
限制性内切酶ApeKI
产品介绍
  • 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
  • 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
  • 限制性内切酶酶切位点:G/CWGC

产品来源

大肠杆菌菌株,携带有超嗜热需氧古生菌(Aeropyrum pernix)K1(ATCC 700893)的 ApeKI 基因。

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,75℃ 下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ r3.1
    Incubate at75℃

    1X NEBuffer™ r3.1
    100 mM NaCl
    50 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: 25%
    NEBuffer™ r2.1: 50%
    NEBuffer™ r3.1: 100%
    rCutSmart™ Buffer: 10%

    稀释兼容性

    • 稀释液 B

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    300 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    500 µg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 不敏感
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

    同裂酶

    TseI

    在不同温度下的活性

    @37℃: 10%

  • 注意事项

    1. ApeKI 是 TseI 的同裂酶。
    2. ApeKI 是一种高热稳定性限制性内切酶,在温度高达 95℃ 时仍有活性。95℃ 条件下,ApeKI 的半衰期为 20 分钟。
    3. 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
    4. CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。

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