BmgBI
产品介绍
- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 限制性内切酶酶切位点:CACGTC(-3/-3)
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自巨大芽孢杆菌( Bacillus megaterium)(T. Le)的 BmgBI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X NEBuffer™ r3.1
Incubate at 37℃ 1X NEBuffer™ r3.1
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: <10%
NEBuffer™ r2.1: 10% NEBuffer™ r3.1: 100%
rCutSmart™ Buffer: 10%稀释兼容性 贮存溶液
10 mM Tris-HCl
200 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃ 热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性 dam 甲基化: 不敏感 dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 阻断酶切 同裂酶 AjiI BtrI
- 注意事项
- BmgBI 是 BtrI 的同裂酶。
- 由于 BmgBI 的识别位点为非回文序列,被 BmgBI 切割产生的 DNA 片段连接后,只有 50% 的连接位点能够重新生成 BmgBI 识别位点。
- CpG 甲基化阻断酶切。
- 基于反应中酶的稳定性,除非增加酶量,否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性
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