细胞介绍

该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用，无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化。

细胞特性

1） 来源：急性单核细胞白血病，单核细胞

2） 形态：单核细胞，悬浮

3） 含量：>1x106 细胞数

4） 规格：T25瓶（15ml离心管）或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

细胞特性

1） 细胞来源于手术切除的正常包皮组织。

2）细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。

2） 经鉴定细胞纯度高于90%。

4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5）细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。

一．培养基及培养冻存条件准备

1） 准备RPMI-1640（推荐iCell-0002）培养基；优质胎牛血清，10%；0.05 mM β－巯基乙醇(细胞培养级 推荐：iCell-8211)；双抗，1%。

2） 参考传代比例：传代时控制细胞密度在2-4 ×105cell / mL，并在细胞生长至8-10 ×105cell / mL时进行传代。

3） 参考换液频率：传代时换液

4） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

5） 冻存液：完全培养液95%，DMSO 5%（使用该冻存液后，按照我库的经验复苏存活率约50%，复苏后需要额外培养7-10天才能恢复生长）

6） 【注意事项】：

该细胞为悬浮细胞，根据培养经验以及客户的反馈，传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利，因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。

1. 您在收到我们提供的用15mL离心管（充液为完全培养基）发货的细胞后，请不要通过离心的方式收集细胞，可以先准备两个新的T25培养瓶，然后将细胞混合均匀后移入两个新的T25培养瓶中，补加培养基到10ml。放入到37℃培养箱中。

2. thp-1悬浮细胞。该细胞在培养时更喜欢温和处理，培养时尽量少对细胞进行离心处理以此造成对细胞的伤害。换液时不要全培养基更换，建议您使用【半换液法】进行传代，添加细胞培养基以稀释细胞至维持密度即可。

3.  细胞对血清质量较为敏感，我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。FBS不要灭活，如果细胞生长缓慢请尝试使用其他FBS或暂时将FBS浓度增加到20%

4.  该细胞的培养液中需添加β-巯基乙醇（细胞培养级别），若不添加，可能会对细胞状态造成影响。

β-巯基乙醇的稳定性有限，不可将β-巯基乙醇添加到完全培养基中长期储存，在每次传代或液体添加时再添加β-巯基乙醇。

β-巯基乙醇（2-巯基乙醇）被添加到淋巴细胞或其他细胞培养物中，因为在培养基中使用的FBS中氨基酸半胱氨酸供不应求，而胱氨酸则很多。有些细胞（例如T细胞）无法将半胱氨酸转运到细胞质中，必须将其转化为半胱氨酸。β-巯基乙醇将胱氨酸还原为可被细胞转运的形式，然后转化为细胞生长所需的半胱氨酸。  β-巯基乙醇还是一种还原剂，可以分解培养中细胞产生的许多有毒代谢产物，从而改善细胞周围的环境。

5.  该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围（具体请参考细胞说明书）。

6 . 该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量。

7 .通常情况下可以通过向正在生长的细胞中添加完全培养基来维持细胞的生长，每7天可以将细胞离心并重悬于新配的培养基中，来完成细胞的全换液。

ATCC有关thp-1细胞保持细胞活力的说明

（频繁的细胞计数是监测thp-1的**方法。这些细胞应该每2至3天通过向烧瓶中简单加入少量新鲜培养基（使它们具有条件培养基）来培养。您不需要每次都离心细胞并重新传代。当在我们的实验室中培养时，到第2天，细胞通常可以扩增到具有更多培养基的更大的烧瓶中。当细胞密度达到8×10^5个活细胞/ ml时需要进行传代。不允许细胞密度超过1×10（6）活细胞/ ml。）