检测原理：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预先包被抗人IL-2Rα单克隆抗体，样本中的IL-2Rα与固相抗体结合后，加入生物素标记的检测抗体形成复合物，再通过辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素催化TMB底物显色。显色强度与样本中IL-2Rα浓度成正比，450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

基本原理：

该试剂盒采用‌双抗体夹心ELISA法‌：

微孔板预先包被特异性抗人sIL-2Rα抗体；

加入标准品或待测样本后，样本中的sIL-2Rα与固相抗体结合；

洗涤后加入生物素标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-检测抗体”复合物；

再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素，催化TMB底物显色（蓝色）；

加入终止液后颜色转为黄色，使用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与sIL-2Rα浓度呈正相关，通过标准曲线即可计算样本中sIL-2Rα含量。

主要参数：

不同品牌的试剂盒参数略有差异，综合主流产品信息如下：

‌检测范围‌：约78 pg/mL – 5000 pg/mL

‌灵敏度‌：最低可达19.5 pg/mL，部分产品可达30 pg/mL

‌样本类型‌：血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆、尿液等

‌规格‌：常见为96T或48T，满足不同实验规模需求

‌检测时间‌：通常3.5小时左右完成

‌保存条件‌：2–8℃避光保存，部分产品有效期可达12个月（-20℃）

‌检测波长‌：主波长450 nm，参考波长540–630 nm

试剂盒组成：

‌预包被微孔板‌：96孔或48孔（含抗IL-2Rα抗体）

‌标准品‌：冻干粉，需复溶后稀释（6个浓度梯度，S0为空白对照）

‌检测抗体‌：HRP标记的抗IL-2Rα生物素化抗体

‌显色底物‌：TMB溶液（A液+B液）

‌终止液‌：2M硫酸溶液

‌洗涤液‌：20×浓缩液，需稀释后使用

‌封板膜‌：用于温育步骤密封

‌说明书‌：含操作流程及注意事项

‌保存条件‌：2–8℃避光保存，有效期6–12个月。

操作步骤

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一、试剂准备‌：

标准品：复溶后按说明书梯度稀释，现配现用。

洗涤液：浓缩液稀释至1×工作液（如20 mL浓缩液+380 mL蒸馏水）。

‌二、加样与温育‌：

每孔加入100 μL标准品或样本，37℃避光温育60分钟。

洗涤5次，拍干后加入100 μL检测抗体，37℃温育30分钟。

三、显色与终止‌：

每孔加入50 μL TMB底物，37℃避光显色15分钟。

加入50 μL终止液，蓝色转为黄色，15分钟内测定OD值。

‌四、结果计算‌：

以标准品浓度（pg/mL）为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

样本浓度=曲线拟合值×稀释倍数（如有）。

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