| CAS NO: | 2645-32-1 |
| 包装 | 价格(元) |
| 10mM (in 1mL DMSO) | 电议 |
| 5mg | 电议 |
| 25mg | 电议 |
| 100mg | 电议 |
| Physical Appearance | A solid |
| Storage | Store at -20°C |
| M.Wt | 223.28 |
| Cas No. | 2645-32-1 |
| Formula | C7H5N5S2 |
| Solubility | insoluble in H2O; insoluble in EtOH; ≥11.15 mg/mL in DMSO |
| Chemical Name | (2,6-diamino-5-thiocyanatopyridin-3-yl) thiocyanate |
| Canonical SMILES | C1=C(C(=NC(=C1SC#N)N)N)SC#N |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。 |
PR-619[(2,6-diamino-5-thiocyanatopyridin-3-yl) thiocyanate]是一种可逆的和细胞通透性的广谱去泛素化酶（DUB）抑制剂[1][2][3]，有效抑制几乎所有的半胱氨酸蛋白酶DUBs[4]，与其它蛋白酶相比（比如calpain 1或cathepsins），对DUBs具有选择性[3]。PR-619诱导（肿瘤）细胞死亡，其EC50值在低微摩尔范围[1]。
去泛素化酶（DUB，deubiquitylating enzyme），也被称为泛肽酶或去泛素蛋白，可以对靶蛋白进行去泛素化。泛素化是泛素蛋白酶体系统（UPS）的组成部分，泛素化的蛋白随后被蛋白酶体降解。泛素蛋白酶体系统（UPS）和/或自噬途径的失败可能导致蛋白聚集，是许多神经退行性疾病的病理标志[2]。
在OLN-t40细胞中，7-10 μM浓度范围的PR-619具有细胞毒性，半数最大细胞毒性在处理后的24小时出现。与MG-132类似，7-12.5 μM浓度范围的PR-619在24小时内引起泛素化蛋白的丰度增加。与MG-132不同，PR-619不能抑制细胞裂解物中蛋白酶体的酶活性，而仅在活细胞中具有抑制活性[2]。体外系统表明，PR-619能够稳定微管网络，导致tau蛋白在微管组织中心的周围聚集[5]。
参考文献：
[1]. Mikael Altun, Holger B. Kramer, Lianne I. Willems, et al. Activity-Based Chemical Proteomics Accelerates Inhibitor Development for Deubiquitylating Enzymes. Chemistry & Biology, 2011, 18(11): 1401-1412.
[2]. Veronika Seiberlicha, Olaf Goldbauma, Victoria Zhukareva, et al. The small molecule inhibitor PR-619 of deubiquitinating enzymes affects the microtubule network and causes protein aggregate formation in neural cells: Implications for neurodegenerative diseases. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research, 2012, 1823(11): 2057–2068.
[3]. Iraia García-Santisteban, Godefridus J Peters, Elisa Giovannetti, et al. USP1 deubiquitinase: cellular functions, regulatory mechanisms and emerging potential as target in cancer therapy. Molecular Cancer, 2013, 12:91.
[4]. Maria Stella Ritorto, Richard Ewan, Ana B. Perez-Oliva, et al. Screening of DUB activity and specificity by MALDI-TOF mass spectrometry. Nature Communications, 2014, 5:4763.
[5]. Laura J Blair, Bo Zhang and Chad A Dickey, et al. Potential synergy between tau aggregation inhibitors and tau chaperone modulators. Alzheimer's Research & Therapy, 2013, 5:41.
| 细胞实验: [1] | |
细胞系 | OLN-t40细胞，GFP-LC3-OLN细胞 |
制备方法 | 该化合物在DMSO中的溶解度大于10 mM，若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。 |
反应条件 | 间接免疫荧光测定：18小时。 |
实验结果 | 使用编码GFP-LC3融合蛋白的质粒稳定转染OLN-t40细胞，10 μM PR-619给药18小时，使用针对LC3的抗体进行间接免疫荧光。9 μM PR-619 处理GFP-LC3-OLN细胞16小时，随后，将细胞在37℃下与LysoTracker Red（250 nM）孵育30分钟。结果表明，PR-619代表了具有广泛特异性的DUB抑制剂。此外，PR-619不会损害自噬流量。 |
References: [1] Veronika Seiberlich, Janika Borchert, VIctora Zhukareva, Christiane Richter-Landsberg. Inhibition of Protein Debiquitination by PR-619 Activates the Autophagic Pathway in OLN-t40 Oligodendroglial Cells. Cell Biochem Biophys , 2013; 67:149–160. | |
| 描述 | PR-619是一种非选择性的、可逆的去泛素化酶（DUBs）抑制剂，EC50值为1-20 μM。 | |||||
| 靶点 | USP2 core | USP4 | USP20 | JOSD2 | DEN1 | |
| IC50 | 7.2 μM (EC50) | 3.93 μM (EC50) | 5.10 μM (EC50) | 1.17 μM (EC50) | 4.98 μM (EC50) | |
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