产品介绍 目录号 Serial | SCSP-201 | 标识符 Identifier | CSTR:19375.09.3101MOUSCSP201 | 描述 Description | 1991年8月,德国海德堡的欧洲分子生物学实验室(EMBL)Kristina Vintersten用129X1×129S1品系的3.5天囊胚成功建立R1细胞,R1/E细胞是R1的亚克隆。该细胞系已被证明具有生殖能力,其中F1代毛色为单一的鼠灰色,F2代两个毛色基因分离。这种分离可能导致产生白色、浅棕色、黑色等几种毛色,这取决于生殖系嵌合体亲本的遗传背景。R1的多能性最初通过四倍体胚胎检测,当然也可以用二倍体胚胎检测。然而,当进行四倍体聚集体检测时,来自第14代的约20%的亚克隆具有R1的原始发育潜能。R1衍生的动物成年后可育。将经过基因改造的R1细胞注射到C57囊胚中或将其与CD-1或远交系ICR 8细胞期胚胎聚集,可以产生高效的生殖系传递。90%以上敲除克隆通过聚集嵌合体进入生殖系(n> 60)。每个批次均通过本库支原体检测,结果为阴性。 培养时需使用昆明白MEF(SCSP-101R)作为饲养层细胞。 | 动物种别 Organism | 小鼠,129X1×129S1品系 | 性别 Gender | 雄性 | 组织来源 Tissue and Cell Type | 小鼠3.5 dpc胚胎内细胞团 | 形态 Morphology | 球形克隆,贴壁生长 | 培养基和添加剂 Complete Growth Medium and Culture Conditions | mES完全培养液配方(600 ml): DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES级FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(终浓度为1000U/ml) β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。 | 供应限制 Permits and Restrictions | A。仅供研究之用。 | REFERENCE | Matise M, et al., Production of targeted embryonic stem cell clones. In: Matise M, et al., Gene Targeting: A Practical Approach. Oxford, Oxford University Press, 101-132, 1999Nagy A, et al. Derivation of completely cell culture-derived mice from early-passage embryonic stem cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA : 8424-8428, 1993. PubMed: 8378314Wood SA, et al. Non-injection methods for the production of embryonic stem cell-embryo chimaeras. Nature 365: 87-89, 1993. PubMed: 8361547Nagy A, Rossant JProduction and analysis of ES-cell aggregation chimeras. In: Nagy A, Rossant J. Gene Targeting: A Practical Approach. Oxford, Oxford University Press, 177-206, 1999 |
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