小肠二糖酶是碳水化合物消化道吸收的关键酶,麦芽糖酶、蔗糖酶和乳糖酶是3种重要的二糖酶,分别水解麦芽糖、蔗糖和乳糖变成相应的单糖而被机体吸收.
机体由于缺乏乳糖酶等双糖酶,可导致食物中糖类消化吸收障碍而使未消化吸收的糖类进入大肠,被大肠中细菌分解产生CO2、H2等,引起腹泻等症状.
检测原理:
乳糖酶作用于底物产生单糖,该单糖在其氧化酶的作用下产生氧化物质,氧化物质同显色剂结合产生红色的产物,用分光光度计测定其光密度值,从而测定出乳糖酶的活性。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约40分钟,可测50例左右样本。
2、取样量微:本法取样量仅为10l
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =96%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测动物组织、肠黏膜等,效果均佳。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为505nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按步骤取样10ul加入底物液
2、漩涡混匀,37℃孵育20分钟
3、加入终止剂和显色剂显色,37℃水浴15分钟
4、505nm波长,0.5cm光径,比色