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植物组织果糖含量检测试剂盒(微量法)
植物组织果糖含量检测试剂盒(微量法)图片
包装: 100管/96样
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产品介绍

果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。

在酸性条件下果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。

技术指标:

最低检出限:0.065mg/ml

线性范围:0.5-35mg/ml

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

产品内容:

试剂名称规格保存条件
提取液液体110ml×1瓶2-8℃
试剂一粉剂×1支2-8℃
试剂二液体25ml×1瓶2-8℃
试剂三液体6ml×1瓶2-8℃
试剂四粉剂0.5g×1瓶室温

溶液的配制:

试剂一:10mg果糖,临用前加1ml蒸馏水溶解,再用蒸馏水稀释为4mg/ml的果糖标准液。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

称取约0.05g样本,常温研碎;加入0.5ml提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于80℃水浴锅中10min(盖紧,以防止水分散失),振荡3~5次,冷却后,4000g,常温离心10min,取上清;加入少量(约2mg)试剂四,80℃脱色30min(盖紧,以防止水分散失);再加入0.5ml提取液,4000g,常温离心10min,取上清液测定。

二、测定步骤

1.分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。

2.样本测定(在1.5ml EP管中依次加入下列试剂):

试剂(μL)空白管标准管测定管
样本--30
试剂一-30-
蒸馏水30--
试剂二210210210
试剂三606060

混匀,80℃水浴反应10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后取200μL至微量玻璃比色皿或96孔板中测定480nm处光吸收值,记为A空白管、A标准管、A测定管,并计算ΔA测定=A测定管-A空白管、ΔA标准=A标准管-A空白管。

三、果糖含量计算:

1.按样本蛋白浓度计算

果糖含量(mg/mg prot)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V样总÷(Cpr×V样总)=4×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr

2.按样本质量计算

果糖含量(mg/g质量)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V样总÷W=4×ΔA测定÷ΔA标准÷W C标准管:标准管浓度,4mg/ml;V样总:加入提取液体积,1ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g。

注意事项:

如果样本吸光值大于1.1,建议将样本用提取液稀释后进行测定

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