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产品信息

细胞简介：

猪心脏瓣膜内皮细胞分离自心脏瓣膜组织；心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。心脏瓣膜在心脏永不停止的血液循环活动中扮演的角色即普通又关键：瓣膜相当于门卫，阻止血液回流于刚刚离开的心室。在心房与心室之间，在心室与离开心室的血管之间，都有瓣膜。血液流过后，瓣膜就会合上最常见的瓣膜问题是二尖瓣脱垂，“二尖瓣”这个词源自“主教冠”，它是主教戴的帽子，有两个尖。位于左心房和左心室之间的瓣膜不能正常闭合。

方法简介：

公司实验室分离的猪心脏瓣膜内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的猪心脏瓣膜内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
操作流程

细胞接收处理：

稳定培养4小时后，根据细胞密度决定换液或传代。

若细胞悬浮或部分悬浮，需离心后重悬于含15%血清的培养基，继续培养2-3天观察贴壁情况。

传代操作（贴壁细胞示例）：

四步消化法（推荐用于难消化细胞）：

弃旧培养基，用新培养基轻柔洗涤1-2次去除死细胞。

加入少量培养基吹打，收集贴壁不牢的细胞。

加入0.3ml胰酶润洗后弃去，再加入1ml胰酶消化至细胞间隙明显。

立即终止消化，吹打后分瓶培养。

培养操作规范

细胞接收后需立即检查是否漏液，静置2-4小时稳定状态。复苏时需37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于新鲜培养基。传代建议在80-90%汇合度时进行，使用0.25%胰蛋白酶消化1-3分钟，以1:2至1:5比例分瓶。冻存需配制含10%DMSO的冻存液，采用程序降温后转入液氮保存。所有操作需严格无菌，建议在二级生物安全柜内完成。

质量检测与注意事项

细胞需确保不含有HIV-1、HBV、HCV等病原体及支原体污染。运输方式可选择干冰冻存（-80℃保存不超过1个月）或常温培养瓶运输。收到细胞后需3天内反馈异常情况，操作失误或非推荐培养体系导致的细胞问题不予重发。特别注意：该细胞仅限科研使用，禁止用于临床治疗。

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