大鼠多巴胺(DA)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液等样本中的多巴胺（DA）含量。试剂盒具有高灵敏度、高特异性和稳定的重复性，适用于科研用途。

检测原理

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠多巴胺抗体作为捕获抗体。

抗原结合：样本中的多巴胺与捕获抗体结合，再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入底物TMB后，在HRP催化下产生蓝色产物，终止液（酸性溶液）使其转为黄色，颜色深度与样本中多巴胺浓度正相关。

定量分析：通过450 nm波长测定吸光度（OD值），根据标准曲线计算浓度。

样本处理与保存

血清/血浆：全血室温静置2小时或4℃过夜后离心（2000-3000×g，20分钟），取上清分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

组织匀浆：按比例加入PBS匀浆后离心取上清。

细胞上清液：直接离心去除沉淀后检测或保存。

试剂盒组成

预包被微孔板

多巴胺标准品

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

封板膜、说明书

操作步骤

平衡试剂：所有组分室温平衡15-30分钟。

标准品稀释：按说明书梯度稀释。

加样：每孔加入标准品或样本50 μL，随后加入检测抗体50 μL，37℃孵育60分钟。

洗涤：用洗涤液洗板5次，拍干。

显色：每孔加TMB 100 μL，避光反应15分钟。

终止与检测：加终止液50 μL，15分钟内测定OD值。

注意事项

样本要求：避免溶血或脂血；高浓度样本需预稀释。

操作规范：加样时间控制在5分钟内，使用排枪可提高效率；每批次需同步制作标准曲线。

试剂保存：未开封试剂盒4℃保存（有效期6个月），开封后板条需密封防潮；底物避光。

质量控制：建议做复孔检测，CV值应＜15%。

技术参数

检测范围：详见标准曲线（通常为0.1-100 ng/mL）。

灵敏度：≤0.05 ng/mL。

交叉反应：与大鼠同类神经递质无显著交叉。
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