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支链淀粉测试盒(比色法)
支链淀粉测试盒(比色法)图片
货号:A152-2-1
参考价格:912元/盒
包装:50管/48样


产品介绍

测定原理:
       利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。

需自备的仪器和用品:
       可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。

试剂的组成和配制(50T/48样):
试剂一:液体50ml×1 瓶;4°C保存;
试剂二:乙醚50ml×1 瓶;(自备)
试剂三:液体50ml×1 瓶;4°C保存;
试剂四:液体4ml×1 瓶; 4°C保存;
试剂五:液体1ml×1 瓶;4°C保存;

淀粉提取:
       称取0.01~0.02g 烘干样本(建议称取约0.01g)于研钵中研碎,加入1ml 试剂一,充分匀浆后转移到EP 管中,80°C水浴提取30min,3000g,25°C离心5min,弃上清,留沉淀,加入1ml 试剂二(乙醚)振荡混匀5min,3000g,25°C离心5min,弃上清,留沉淀,加入1ml 试剂三充分溶解,90°C水浴10min,冷却后待测。

测定步骤:
       测定管:在EP 管中依次加入100μl样本,70μl试剂四,600μl蒸馏水,10μl试剂五,220μl 蒸馏水,混匀,分别测定550nm和743nm 处吸光值,△A测定=A550-A743。
       空白管:在EP 管中依次加入100μl试剂三,70μl试剂四,600μl蒸馏水,10μl试剂五,220μl 蒸馏水,混匀,分别测定550nm和743nm 处吸光值,△A空白=A550-A743。

支链淀粉含量计算:
       标准条件下测定的回归方程为y=0.1214x+0.0076;x 为标准品浓度(mg/ml),y 为吸光值。
1、按照蛋白浓度计算
     支链淀粉含量(mg/mgprot)=[( △A测定-△A空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)
                                         =8.24×(△A测定-△A空白-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干重计算
     支链淀粉含量(mg/g干重)= [(△A测定-△A空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2)
                                        =8.24×(△A测定-△A空白-0.0076) ÷W
      V1:加入反应体系中样本体积,0.1ml               V2:加入提取液体积,1 ml
      Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml                          W:样本质量,g

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