| CAS NO: | 856925-71-8 |
| 包装 | 价格(元) |
| 10mM (in 1mL DMSO) | 电议 |
| 10mg | 电议 |
| 25mg | 电议 |
| Physical Appearance | A solid |
| Storage | Store at -20°C |
| M.Wt | 292.33 |
| Cas No. | 856925-71-8 |
| Formula | C18H16N2O2 |
| Solubility | insoluble in EtOH; insoluble in H2O; ≥14.62 mg/mL in DMSO |
| Chemical Name | (S)-3a-hydroxy-6-methyl-1-phenyl-3,3a-dihydro-1H-pyrrolo[2,3-b]quinolin-4(2H)-one |
| Canonical SMILES | O[C@@]12CCN(C3=CC=CC=C3)C1=NC4=CC=C(C)C=C4C2=O |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。 |
(-)-Blebbistatin是一种细胞通透性的非肌肉肌球蛋白II型ATP酶抑制剂，IC50值为2 μM [1,2]。
非肌肉肌球蛋白II（NM II），肌动蛋白结合蛋白，在调节细胞迁移、粘附和分化中起重要作用 [4]。NM II在这些过程中的重要性通过基因缺失和突变的方法进行研究，发现NM II突变影响范围广泛的蛋白功能，引起单基因遗传病 [5,6]。
(-)-Blebbistatin是一种小分子抑制剂，优先结合肌球蛋白-ADP-Pi复合体，从而减慢磷酸根的释放 [2]。在几个物种的体外实验中，(-)-Blebbistatin完全消除肌动蛋白激活的Mg-ATPase收缩活性和肌球蛋白II的收缩动力（IC50 = 0.5-5.0 μM）[8,9]，但对平滑肌肌球蛋白II（IC50 =80 μM），和肌球蛋白I、V和X的影响很小 [3]。而且，blebbistatin可以抑制哺乳动物动脉平滑肌（IC50=5 μM）[9]。Blebbistatin阻断肌动蛋白分离状态下的肌球蛋白II和防止僵化肌动球蛋白交联的特性是其体内应用的一个很大的优势 [2,11]。
在恒压灌注模型系统中，CB和TM细胞用blebbistatin（10-200 M）处理后，细胞形态发生改变，肌动蛋白应力纤维的含量降低。Blebbistatin的效应在24小时内洗脱后是完全可逆的 [10]。Blebbistatin抑制单个细胞的收缩，而不改变细胞内钙瞬变（IC50 = 0.43 μM）的形态。
参考文献：
[1]. Straight AF, Cheung A, Limouze J, et al. Dissecting temporal and spatial control of cytokinesis with a myosin II Inhibitor. Science, 2003, 299:1743–1747.
[2]. Kovacs M, Toth J, Hetenyi C, Malnasi-Csizmadia A, Sellers JR. Mechanism of blebbistatin inhibition of myosin II. J Biol Chem, 2004, 279:35557–35563.
[3]. Limouze J, Straight AF, Mitchison T, Sellers JR. Specificity of blebbistatin, an inhibitor of myosin II. J Muscle Res Cell Motil, 2004, 25:337–341.
[4]. Miguel Vicente-Manzanares, Xuefei Ma, Robert S. Adelstein,Alan Rick Horwitz. Non-muscle myosin II takes centre stage in cell adhesion and migration.Nat Rev Mol Cell Biol, 2009 Nov, 10(11): 778–790.
[5]. Burt RA, Joseph JE, Milliken S, Collinge JE, Kile BT. Description of a novel mutation leading to MYH9-related disease. Thrombosis Research, 2008, 122(6): 861-863.
[6]. Butcher DT, Alliston T, Weaver VM. A tense situation: forcing tumour progression. Nature Reviews Cancer, 2009 Feb, 9(2):108-122.
[7]. Chen Y, Boukour S, Milloud R, Favier R, Saposnik B, Schlegel N, et al. The abnormal proplatelet formation in MYH9-related macrothrombocytopenia results from an increased actomyosin contractility and is rescued by myosin IIA inhibition. Journal of thrombosis and haemostasis : JTH , 2013, 11:2163-2175.
[8]. Fedorov VV, Lozinsky IT, Sosunov EA, Anyukhovsky EP, Rosen MR, Balke CW, et al. Application of blebbistatin as an excitation-contraction uncoupler for electrophysiologic study of rat and rabbit hearts. Heart rhythm: the official journal of the Heart Rhythm Society, 2007, 4:619-626.
[9]. Zhang X-h, Aydin M, Kuppam D, Melman A, DiSanto ME. In Vitro and In Vivo Relaxation of Corpus Cavernosum Smooth Muscle by the Selective Myosin II Inhibitor, Blebbistatin. The Journal of Sexual Medicine, 2009, 6:2661-2671.
[10]. Zhang M, Rao PV. Blebbistatin, a novel inhibitor of myosin II ATPase activity, increases aqueous humor outflow facility in perfused enucleated porcine eyes. Investigative ophthalmology & visual science, 2005, 46:4130-4138.
[11]. Lucas-Lopez C, Allingham JS, Lebl T, Lawson CP, Brenk R, Sellers JR, et al. The small molecule tool (S)-(-)-blebbistatin: novel insights of relevance to myosin inhibitor design. Organic & biomolecular chemistry, 2008, 6:2076-2084.
| 激酶实验 [1]: | |
肌动蛋白活化的MgATPase检测 | 利用NADH耦合方法，使用Beckman DU 640分光光度计测量肌动蛋白活化的MgATPase活性。Blebbistatin[（+）和（-）对映体的外消旋混合物]溶解在DMSO中，所有样品中DMSO浓度维持在恒定浓度5％。 |
| 细胞实验 [2, 3]: | |
细胞系 | 牛角膜内皮细胞 |
溶解方法 | 该化合物在DMSO中的溶解度 >10 mM。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37°C 加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20°C 可放置数月。 |
反应时间 | 10 μM处理5分钟; 或5 μM处理20分钟 |
应用 | Blebbistatin有效抑制小鼠心肌内肌动蛋白与肌球蛋白的相互作用，其作用分子机制不是通过钙流及其活化体系。此外，Blebbistatin处理牛角膜内皮细胞能干预凝血酶抑制的细胞内钙流振荡。 |
| 动物实验 [4]: | |
动物模型 | 斑马鱼胚胎模型 |
剂量 | 5-25 μM |
应用 | Blebbistatin以剂量相关的方式诱导斑马鱼胚胎心脏二分叉。 |
注意事项 | 请于室内测试所有化合物的溶解度。实际溶解度和理论值可能略有不同，这是由实验系统的误差引起的，属于正常现象。 |
References: 1. Limouze, J., Straight, A. F., Mitchison, T. and Sellers, J. R. (2004) Specificity of blebbistatin, an inhibitor of myosin II. J Muscle Res Cell Motil. 25, 337-341 2. Ponsaerts, R., D'Hondt, C., Bultynck, G., Srinivas, S. P., Vereecke, J. and Himpens, B. (2008) The myosin II ATPase inhibitor blebbistatin prevents thrombin-induced inhibition of intercellular calcium wave propagation in corneal endothelial cells. Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 4816-4827 3. Dou, Y., Arlock, P. and Arner, A. (2007) Blebbistatin specifically inhibits actin-myosin interaction in mouse cardiac muscle. Am J Physiol Cell Physiol. 293, C1148-1153 4. Wang, X., Chong, M., Wang, H., Zhang, J., Xu, H. and Liu, D. (2015) Block the function of nonmuscle myosin II by blebbistatin induces zebrafish embryo cardia bifida. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 51, 211-217 | |
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