| CAS NO: | 1346704-33-3 |
| 包装 | 价格(元) |
| 10mM (in 1mL DMSO) | 电议 |
| 5mg | 电议 |
| 10mg | 电议 |
| 25mg | 电议 |
| Physical Appearance | A solid |
| Storage | Store at -20°C |
| M.Wt | 541.69 |
| Cas No. | 1346704-33-3 |
| Formula | C31H39N7O2 |
| Synonyms | GSK-343;GSK 343 |
| Solubility | insoluble in H2O; insoluble in EtOH; ≥7.58 mg/mL in DMF with gentle warming |
| Chemical Name | N-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1H-pyridin-3-yl)methyl]-6-[2-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-4-yl]-1-propan-2-ylindazole-4-carboxamide |
| Canonical SMILES | CCCC1=C(C(=O)NC(=C1)C)CNC(=O)C2=C3C=NN(C3=CC(=C2)C4=CC(=NC=C4)N5CCN(CC5)C)C(C)C |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。 |
GSK343是一种选择性的和SAM竞争性的组蛋白赖氨酸甲基转移酶EZH2抑制剂，IC50值为4 nM[1]。
Zeste基因增强子同源物2（EZH2）是蛋白复合体（多梳抑制复合体2，PRC2）的催化亚单位，将SAM的甲基转移给H3K27，催化H3K27的甲基化。H3K27的三甲基化可导致靶基因的转录抑制，如RUNX3、FOXC1和BRCA1。EZH2的过表达和突变在多种癌症中出现，表明EZH2是癌症治疗有吸引力的靶标。作为一种有效的EZH2抑制剂，GSK343通过与辅因子SAM竞争，从而抑制该酶的活性[1，2]。
GSK343是一种选择性的EZH2抑制剂，对其它需要SAM作为辅因子的酶没有显著的抑制作用，包括DNMT、MLL、PRMT和SETMAR。由于EZH1与EZH2高度同源，GSK343对EZH1也具有一定程度的效应，IC50值为240 nM。在培养的HCC1806乳腺癌细胞中，GSK343剂量依赖地减少H3K27me3，IC50值为174 nM。此外，GSK343抑制一些乳腺癌和前列腺癌细胞的增殖。在LNCaP细胞中，GSK343抑制细胞生长，IC50值为2.9 μM。在人EOC细胞中，GSK343显著抑制细胞侵袭，诱导细胞凋亡。在A549、MDA-MB-231和HepG2细胞中，GSK343诱导LC3-II的积累和自噬。在HepG2细胞中，GSK343增强sorafenib（多激酶抑制剂）的抗肿瘤活性，可能减少EZH2的表达[1，3，4]。
由于在动物模型中的高清除率，GSK343仅作为一种工具，用于体外研究EZH2[1]。
参考文献：
[1] Verma S K, Tian X, LaFrance L V, et al. Identification of potent, selective, cell-active inhibitors of the histone lysine methyltransferase EZH2. ACS medicinal chemistry letters, 2012, 3(12): 1091-1096.
[2] Ferraro A, Boni T, Pintzas A. EZH2 Regulates Cofilin Activity and Colon Cancer Cell Migration by Targeting ITGA2 Gene. PloS one, 2014, 9(12): e115276.
[3] Amatangelo M, Garipov A, Li H, et al. Three-dimensional culture sensitizes epithelial ovarian cancer cells to EZH2 methyltransferase inhibition. Cell Cycle, 2013, 12(13): 2113-2119.
[4] Liu T P, Lo H L, Wei L S, et al. S-Adenosyl-L-methionine-competitive inhibitors of the histone methyltransferase EZH2 induce autophagy and enhance drug sensitivity in cancer cells. Anti-cancer drugs, 2015, 26(2): 139.
| 激酶实验 [1]: | |
体外抗组蛋白甲基转移酶生化试验 | 使用含5种成分的PRC2复合物(Flag-EZH2、EED、SUZ12、AEBP2和RbAp48)测定抗EZH2的活性。实验方案概括如下：使化合物固体溶于100% DMSO中，制备10 mM原液。在384孔板中，准备用于11次连续稀释的主板（以1:3比例稀释，柱6和18与DMSO对照组具有相同的体积），使用声控分配技术将稀释液分装到即用的分析板上，以制备100 nL化合物与DMSO对照液样本。使用多点结合分配将含等体积的10 nM EZH2和底物溶液（(5 ?g/mL HeLa核小体和0.25 ?M [3H]-SAM）加入到分析板中。将反应板孵育1小时后，使用等体积的0.5 mg/mL PS-PEI Imaging Beads (RPNQ0098) （含0.1 mM未标记的SAM）进行淬灭。将平板密封，使其置于暗处，放置30分钟。在第5分钟，通过Viewlux成像仪获得其发光图像。通过Activity BaseXE对统计数据，如Z’和背景信号，以及剂量反应曲线进行分析。使用384孔SPA实验（与EZH2相同），以EZH1作为含5种成分的PRC2复合物的一部分，对其体外生物活性进行分析。对于EZH1和EZH2，缓冲液成分、试剂分配、化合物制备、淬灭条件以及数据分析均相同，最终测试浓度为20 nM EZH1，5 μM/mL HeLa 核小体以及0.25 μM [3H]-SAM。使用TIBCO Spotfire对pIC50和可视化图像进行进一步的数据分析。将化合物的结果记录在Reaction Biology Corp. (Malvern, PA) 上，以评估它们在组蛋白甲基转移酶试验中的抑制作用。通过HotSpot技术和以微型放射性同位素为基础的滤膜结合测定法分析甲基转移酶的活性。将抑制剂溶解于二甲基亚砜 (DMSO) 中，其测试浓度达100 uM，最终DMSO浓度为2%。将缓冲液（含指定浓度的甲基转移酶以及相应的底物（请见附表））与化合物一起预孵育10分钟。加入1μM S-腺苷-L-[甲基-3H]甲硫氨酸(SAM)启动反应，将其置于30℃下，孵育60分钟，随后将其转移到P81滤纸，使用PBS清洗，检测。 |
| 细胞实验 [1]: | |
细胞系 | 乳腺癌细胞系(HCC1806、Sk-Br-3和ZR-75-1)以及前列腺癌细胞系(DU145、PC3和LNCaP) |
制备方法 | 在DMSO中的溶解度受限。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。 |
反应条件 | ~ 50 μM；6天 |
实验结果 | 在HCC1806肺癌细胞中，GSK343抑制H3K27 (H3K27me3)三甲基化，其IC50值为174 nM。在乳腺癌细胞和前列腺癌细胞中，GSK343有效抑制细胞增殖。此外，前列腺癌细胞系LNCaP对GSK343最敏感，其IC50值为2.9 μM。 |
References: [1]. Verma S K, Tian X, LaFrance L V, et al. Identification of potent, selective, cell-active inhibitors of the histone lysine methyltransferase EZH2. ACS medicinal chemistry letters, 2012, 3(12): 1091-1096. | |
| 描述 | GSK343是一种细胞通透性的EZH2抑制剂，IC50值为4 nM。 | |||||
| 靶点 | EZH2 | |||||
| IC50 | 4 nM | |||||
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