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1-NM-PP1
本产品不向个人销售，仅用作科学研究，不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。
1-NM-PP1图片
CAS NO:221244-14-0
包装与价格：
包装价格(元)
10mM (in 1mL DMSO)电议
5mg电议
10mg电议
25mg电议
50mg电议

产品介绍

化学性质

Physical AppearanceA solid
StorageStore at -20°C
M.Wt331.41
Cas No.221244-14-0
FormulaC20H21N5
Solubilityinsoluble in H2O; ≥16.55 mg/mL in DMSO; ≥9.22 mg/mL in EtOH with gentle warming and ultrasonic
Chemical Name1-tert-butyl-3-(naphthalen-1-ylmethyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-amine
Canonical SMILESCC(C)(C)N1C2=C(C(=N1)CC3=CC=CC4=CC=CC=C43)C(=NC=N2)N
运输条件蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。

资料参考

1-NM-PP1是细胞可渗透的PP1的C3修饰类似物，作为一种强效的和选择性的蛋白激酶家族抑制剂[ 1 ]。

1-NM-PP1 已显示出选择性的突变蛋白激酶抑制作用，作用于v-Src、c-Fyn、c-Abl、CDK2、CAMKII、v-Src-as1、c-Fyn-as1、cAbl-as2、CDK2-as1 和CAMKII-as1，其IC50 值分别为28 μM、1.0 μM、3.4 μM、29 μM、24 μM、4.3 nM、3.2 nM、120 nM、5 nM 和8 nM。1-NM-PP1在低纳摩尔浓度范围内靶向特异性地抑制五种靶点激酶，测得其抑制作用是最可抑制野生型激酶的85倍到400倍范围。此外，体外研究也已表明Cdc28-as1 对1-NM-PP1高度敏感，作用于Cdc28/Clb2 和Cdc28-as1/Clb2，ATP动能Km值分别为35 μM和322 μM， Kcat 值为132 min-1和21.3 min-1，Kcat/Km值为3.7 和0.066，IC50 值分别为22 μM和0.002 μM [ 1 ]。

参考文献： [1] Bishop AC1, Ubersax JA, Petsch DT, Matheos DP, Gray NS, Blethrow J, Shimizu E, Tsien JZ, Schultz PG, Rose MD, Wood JL, Morgan DO, Shokat KM. A chemical switch for inhibitor-sensitive alleles of any protein kinase. Nature. 2000 Sep 21; 407(6802):395-401.

试验操作

激酶实验 [1]:

体外激酶实验

我们在0.2 μCi/μl[γ-32P] ATP存在下在低ATP浓度（10 nM）下进行体外激酶测定（Cdc28除外），使得IC 50值表示抑制常数（Ki）的粗略测量，抑制剂IC 50值的测量参考Liu等人的描述。将纯化的Cdc28-His6（1nM）和MBP-Clb2（3nM）在23℃下与25 μl含有5 μg组蛋白H1,1μCi[γ-32P] ATP（1 μCi/10μl和1 μCi/1mM）、不同浓度的1-NM-PP1在激酶缓冲液（25 mM HEPES-NaOH pH 7.4,10 mM NaCl，10 mM MgCl 2和1 mM二硫苏糖醇）的混合物孵育10分钟。 通过15％SDS-PAGE分析反应产物，然后进行放射自显影。 为了测定Cdc28动力学常数，如上所述孵育和分析不同浓度的[γ-32P] ATP（1 μCi/100μM）。

细胞实验 [2]：

细胞系

PDK1?/? ES细胞

溶解方法

该化合物溶于DMSO。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37℃加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20℃可放置数月。

反应时间

10 μM处理24 h-72 h; 或20 μM处理48小时

应用

1-NM-PP1抑制表达PDK1 L159G而不是WT PDK1的PDK1 - / - ES细胞中PDK1的磷酸化。 此外，1-NM-PP1抑制山梨醇诱导MSK1 S212 T循环磷酸化，ERK/p38MAPK磷酸化位点S581和ERK/p38依赖自磷酸化位点S376。 1-NM-PP1还抑制PDK1 - / - + LG ES细胞中IGF1刺激的PKB/Akt T308磷酸化和S6K活性。

References:

1. Bishop, A. C., Ubersax, J. A., Petsch, D. T., Matheos, D. P., Gray, N. S., Blethrow, J., Shimizu, E., Tsien, J. Z., Schultz, P. G., Rose, M. D., Wood, J. L., Morgan, D. O. and Shokat, K. M. (2000) A chemical switch for inhibitor-sensitive alleles of any protein kinase. Nature. 407, 395-401

2. Tamguney, T., Zhang, C., Fiedler, D., Shokat, K. and Stokoe, D. (2008) Analysis of 3-phosphoinositide-dependent kinase-1 signaling and function in ES cells. Exp Cell Res. 314, 2299-2312