羟脯氨酸在胶原蛋白中占13.4%，在弹性蛋白中占极少量，其它蛋白中均不存在。而胶原蛋白大多分布在皮肤、腱、软骨、血管等处，因此羟脯氨酸的量能 反映结缔组织疾病的胶原代谢情况。有人把皮肤中羟脯氨酸的测定作为筛选抗衰老药物的一个指标。在发育阶段随年龄的增长，其羟脯氨酸在尿中排泄增加，而发育 停止后稳定。老年人的羟脯氨酸比年轻人要少。鼠患有自发性高血压及继发性高血压时，尿中羟脯氨酸含量增加。手术创伤会导致尿羟脯氨酸排泄量的增加，因高 脂、低蛋白、酒精中毒及毒物、营养不良，或肝细胞变性坏死，通过炎症使纤维增加，分割肝小叶，导致肝硬化。肝纤维化时，肝内主要增加的成分为胶原纤维，羟 脯氨酸为胶原纤维所特有，测定肝羟脯氨酸的含量，可换算成肝胶原蛋白的含量，以反映肝纤维化程度。胶原纤维分解主要依赖胶原酶和其它蛋白酶的作用，其分解 产物羟脯氨酸从尿中排出，测定尿羟脯氨酸的含量，可反应胶原降解的情况。通过测定组织及尿中羟脯氨酸的含量，一方面可以判断纤维化程度，同时可以筛选预防 与治疗的药物。

测定原理:
       羟脯氨酸在氧化剂的作用下所产生的氧化产物与二甲氨基苯甲醛作用呈现紫红色，根据其呈色的深浅可推算出其含量。

产品优点如下：
1、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
2、再现性好：变异系数CV=2.1%。
3、回收试验： X =102%。
4、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
5、测试面广：可测动物血清(浆)、组织  、尿液以及各种水产等，效果均佳。

试剂盒组成与配制：（50T/48 样）
试剂一：粉剂×1 瓶，甲液 10ml×1 瓶，乙液 20ml×1 瓶，临用时将粉剂先加甲液 10ml充分溶解（从瓶口向内看，完全溶解完）。然后再加乙液 20ml 充分混匀。配好后的试剂 4°C～8°C冰箱保存 3 个月有效。
试剂二：液体 30ml×1 瓶，4°C冰箱避光保存 3 个月有效。
试剂三：粉剂×1 瓶，溶剂 30ml×1 瓶，临用时将粉剂一支加到 30ml 溶剂中充分溶解，配好后 4°C冰箱避光保存 1 个月有效。
试剂四：标准品 5mg×3 支，4°C冰箱保存 6 个月。
100μg/ml 标准贮备液的配制：测试前将一支标准品用双蒸水溶解后定容至 50ml，4°C冰箱保存 2 周。
5μg/ml 标准应用液的配制：取 100μg/ml 标准贮备液 1ml 加双蒸水定容至 20ml，现用现配。

所需仪器及自备试剂：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为60℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器

样本收集与前处理：
尿液、血清（浆）:可直接测定。
动物组织样本：可直接准确称取组织重量加碱水解液进行水解。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

操作流程：
1、准确称取组织或直接取血清、尿液样本
2、调PH至中性：按说明书进行调PH,最后定容至10 ml,加活性碳离心取上清待测
3、取上清1 ml加R1静置10分钟加R2静置5分钟,加R3,60℃水浴15分钟
4、3500转/分离心10分钟，取上清550nm波长，1cm光径，比色