测定原理:
抗坏血酸过氧化物酶(APX)催化抗坏血酸(ASA)与过氧化氢(H2O2)反应,使ASA氧化成单脱氢抗坏血酸(MDASA)。随着AsA被氧化,溶液中290nm波长下的吸光度值(A290)下降,根据单位时间内A290减少值,计算抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性。ASA氧化量按消光系数2.8(mol/ml)/cm计算。
自备仪器用品:
低温离心机、紫外分光光度、1cm光径石英比色皿、移液枪、研钵、冰和蒸馏水
粗酶液提取:
按组织质量(g):缓冲液体积(ml)=1:9的比例加入试剂一(如0.1g组织加入0.9mlR1缓冲液),冰水浴匀浆,10000rpm/min,离心10min,取上清待测。
储存条件:
试剂于 2~8°C保存可稳定 3 个月。