黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase
XOD)主要存在于哺乳动物的乳汁及肝脾中,属需氧脱氢酶类,是体内核酸代谢中的重要酶,在肝细胞损伤时,此酶早于SGPT释放于血清中,并且升高明显,其对鉴别肝细胞性黄疸及阻塞性黄疸有明显的测定意义,并且在缺氧过程中黄嘌呤脱氢酶很快形成黄嘌呤氧化酶,其对自由基的产生起了重要作用。
检测原理:
XOD可催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,与此同时产生超氧阴离子自由基,当有电子受体及显色剂存在的情况下,生成紫红色结合物,根据后者生成量的多少可以推算出XOD的活力。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约30分钟,可测50左右个样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20l~50l即可测红细胞中的XOD,只需2ml
3、静脉血可测白细胞中的XOD及血小板中XOD,只需5mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的XOD、0.2g组4、织可测线粒体及微粒体中的XOD。
5、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效。
6、再现性好:变异系数CV=1.6%。
7、回收试验: X =102.5%。
8、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
9、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、植物组织、各种水产等,效果均佳。
所需仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为530nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆):可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按步骤加入样本和试剂
2、漩涡混匀,37℃孵育20分钟
3、加入终止液
4、530nm波长,1cm光径,比色