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HK-2人肾近曲小管细胞HK-2(2016年新引进)
产品介绍 目录号
Serial | SCSP-511 | 标识符
Identifier | CSTR:19375.09.3101HUMSCSP511 | 描述
Description | 据报道，人肾近曲小管细胞HK-2含有HPV-16 E6/E7基因的重组逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7。尽管pLXSN 16 E6/E7对新霉素有抗性，但不能用G418分离转导的克隆。该细胞系基于Southern和FISH分析可分离成单个细胞。通过PCR测定，E6/E7基因存在于HK-2基因组中。细胞保留分化良好的PTCs表型。碱性磷酸酶、γ谷氨酰转肽酶、亮氨酸氨肽酶、酸性磷酸酶、细胞角蛋白、α3、β1整联蛋白和纤连蛋白表达阳性。VIII因子相关抗原、6.19抗原和CALLA内肽酶表达为阴性。HK-2细胞保留着近端肾小管上皮细胞的功能特征，例如Na+依赖性/根皮苷敏感性糖转运和腺苷酸环化酶对甲状旁腺有响应，但对抗利尿激素不敏感。该细胞具有生成和储存糖原的能力来证明。HK-2细胞贴壁生长，在甲基纤维素，软琼脂上不生长且不能悬浮生长。每个批次均通过本库支原体检测，结果为阴性。经本库STR检测无误。STR鉴定结果为：Amelogenin: X,Y; CSF1PO: 13; D13S317: 9; D16S539: 11,12; D5S818: 12; D7S820: 10,11; THO1: 9; TPOX: 8,9; vWA: 17,18 | 动物种别
Organism | 人 | 性别
Gender | 成年男性 | 组织来源
Tissue and Cell Type | 肾，皮质/近曲小管 | 形态
Morphology | 上皮样，贴壁生长 | 培养基和添加剂
Complete Growth Medium and Culture Conditions | 人肾近曲小管细胞HK-2完全培养液为Keratinocyte Serum Free Medium (K-SFM) (Invitrogen, 17005-042)
备注1：K-SFM(Invitrogen，17005-042)培养液包含两个组份:基础培养液1瓶(货号10724-011)+生长因子2管(货号37000-015 )。
备注2：按照K-SFM培养液说明书，需额外添加Gentamicin Solution。建议使用Gentamicin/Amphotericin Solution 500×(Gibco, R-015-10)。
参考传代周期：4-6天
参考传代比例：1:2到1:3
参考换液频率：每周2-3次
冻存液：完全培养液92.5%，DMSO 7.5%
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。
注意事项：
1. 该细胞贴壁较慢，为使细胞贴壁更容易，建议可提前在培养皿/培养瓶中铺0.25% 的明胶溶液，并于贴壁24～48小时后再进行后续操作。
2. 该细胞生长不能过密，请在生长密度80%时进行传代。
3. 使用0.05%胰酶消化细胞。同时由于K-sfm为无血清培养液无法终止胰酶消化，所以消化完成后要通过离心(建议125×g离心5到10分钟)去除胰酶，再进行后续操作。
4. K-SFM是一种无血清培养基，准确添加因子：BPE和rEGF后不要过滤，因为EGF可以停留在滤膜上并从培养基中稀释出来。HK-2细胞在无血清培养基中，生长缓慢并且需要一些时间才能贴壁。在培养基中看到许多圆形，漂浮和折射细胞是正常情况，不应丢弃松散附着和圆形的漂浮细胞，收集离心后可以重新加入到培养瓶中。 | 供应限制
Permits and Restrictions | A。仅供研究之用。 | | REFERENCE | Ryan MJ, et al. HK-2: an immortalized proximal tubule epithelial cell line from normal adult human kidney. Kidney Int. 45: 48-57, 1994. PubMed: 8127021 |
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