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己糖激酶(HK)测定试剂盒(紫外法)
己糖激酶(HK)测定试剂盒(紫外法)图片
货号:A077-3-1
参考价格:785元/盒
包装:48样


产品名称
Hexokinase assay kit
己糖激酶测定试剂盒(紫外法)
产品介绍

测定原理:
       HK催化葡萄糖合成 6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化 6-磷酸葡萄糖脱氢生成 NADPH,NADPH 在 340nm 有特征吸收峰。

自备的仪器和用品:
       紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml 石英比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制:
提取液:60ml×1 瓶,4°C保存;
试剂一:液体 30ml×1 瓶,4°C保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4°C保存;临用前加入 30ml 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20°C保存,禁止反复冻融;
试剂三:液体 5ml×1 瓶,4 度保存;
试剂四:粉剂×1 支,-20°C保存,临用前加入 4ml 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20°C保存,禁止反复冻融;
试剂五:粉剂×1 支,-20°C保存,临用前加入 2ml 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分后-20°C保存,禁止反复冻融;
试剂六:粉剂×1 支,-20°C保存,临用前加入 250μl 试剂一和 250μl 蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20°C保存,禁止反复冻融。

样本前处理:
       样本处理详见说明书。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。

操作步骤:

      试剂名称     测定管
     试剂一(μl)400
     试剂二(μl)400
     试剂三(μl)80
     试剂四(μl)80
     试剂五(μl)40
     试剂六(μl)8
     样  本(μl)30

       将上述试剂按顺序加入 1ml 石英比色皿中,立即混匀,加样本的同时开始计时,在 340nm波长下记录 20 秒时的初始吸光度 A1 和 5 分 20 秒时的吸光度 A2,计算△A=A2-A1。

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